進擊2017!科諾安臨床深度交流會?南寧站

“二孩”時代下,孕產婦數量的集中增長、孕產婦年齡的普遍升高以及孕婦家庭想要“確定地”成功生育“完全”健康的寶寶的迫切愿望,給產前遺傳學診斷帶來了新的壓力和挑戰。

面對時代的挑戰,臨床將如何應對?產前遺傳學診斷又將迎來怎樣的新局面?

6月3日,貝瑞和康“科諾安(CNV-Seq)臨床應用深度研討會”第二站在南寧成功舉辦。會議有幸邀請到華西第二醫院劉洪倩教授、廣西自治區人民醫院田矛主任、貴州醫科大學附屬醫院余蕾主任、湖南家輝遺傳專科醫院譚虎博士及廣西17家產前診斷及婦產相關醫療機構的50余位專家齊聚一堂,對CNV-Seq的臨床應用展開了深度交流與討論。

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劉洪倩教授在題為“高通量測序分析在染色體畸變產前診斷中的應用”的報告中指出,出生缺陷防控的重點之一是染色體病,近年來高通量測序技術(NGS)發展迅速,無創產前篩查(NIPS)已經能將T21、T18、T13三大最常見的胎兒染色體非整倍體疾病準確檢測出來,在這樣新的時代背景下隨著就醫意識的改變,選擇介入性產前診斷的孕婦需要更精準和更全面的檢測信息,產前診斷的目標應擴展到核型分析所檢測不到的染色體亞顯微結構異常。

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劉洪倩 ?教授

同時劉教授指出,傳統觀點認為孕婦因擔心術后流產風險而抗拒介入性產前診斷,NIPS的應用將帶來介入性產前診斷量的減少。而根據華西第二醫院的經驗,當羊膜腔穿刺術后胎兒丟失率僅為0.07%,甚至低于染色體結構異常發生率時,該院的介入性產前診斷量并沒有因NIPS的開展而減少,一直呈逐年上升趨勢,今年預計將突破20000例,這充分說明,當下制約產前診斷發展的不再是取材手段,而是取材后應用何種診斷技術才是臨床面臨的挑戰。

針對這一挑戰,劉教授總結到,傳統核型分析技術因其分辨率有限、細胞培養周期長、存在失敗風險、檢測自動化程度低、質控困難等局限性,已經無法完全適應新時代大量、快速、精準、全面的產前診斷需求;快速產前診斷技術如FISH、QF-PCR、MLPA等對非整倍體有較好的診斷效能,但對CNV無法全面準確檢出;染色體微陣列分析(CMA)雖然能檢測染色體亞顯微結構異常,但其因基因組覆蓋不均勻、通量低、成本高等因素不能在產前診斷得到廣泛應用;而近年來發展的基于NGS的染色體結構變異檢測(CNV-Seq)已成功應用于臨床,可一次性準確檢測23對染色體的數目及結構異常,包括核型分析所不能檢出的5Mb以下的染色體亞顯微結構異常。

劉教授分享了其所在產前診斷中心在其本院的NextSeq CN500測序平臺上應用CNV-Seq進行產前診斷的情況。2017年2月底至4月中旬,共有856個高齡、唐篩或NIPS高危、軟指標高風險以及其他高風險的孕婦選擇羊水穿刺后進行CNV-Seq檢測,結果統計顯示,CNV-?Seq與核型分析相比能額外檢出17.39%的染色體異常(小于5Mb的致病性CNV),并且所有致病性CNV經CMA驗證結果完全一致。CNV-Seq甚至還檢測到一例缺失0.14Mb的?Duchenne型肌營養不良癥(DMD)的單基因病攜帶者(4個外顯子缺失,經MLPA驗證證實)。劉教授還強調,CNV-Seq可以與NIPS在NextSeq CN500平臺上合并上機同時開展,通量高、操作簡便、質控簡單、報告周期短,特別是運行成本較低,受到了越來越多孕婦的青睞。

CNV-Seq在產前診斷的臨床效力,在余蕾主任的題為“穩穩的幸福:核型分析 + CNV-Seq的產前診斷模式”的報告中也體現的淋漓盡致。余主任通過詳細的案例講解介紹了其所在中心如何應用CNV-Seq彌補核型分析在新時代產前診斷應用中的不足,成功保障每一份產前診斷報告快速、準確地交給受檢孕婦,使孕婦家庭獲得穩穩的幸福的同時,也給在重壓之下辛勤工作的產前診斷工作者帶來“穩穩的幸福”。余主任介紹,在貴醫附院近期連續300例“核型分析+CNV-Seq”的產前診斷樣本中,242例正常核型及58例異常核型的CNV-Seq檢測結果符合率都達到100%,并且通過CNV-Seq對疑難核型報告的輔助分析大大縮短了產前診斷的報告周期,特別是對核型分析認為染色體多態性的驗證及伴隨著平衡易位容易發生的微小的致病性結構變異的檢出,為核型分析提供了很好的補充。

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余蕾 ?主任

田矛主任則從一名產科臨床大夫的角度結合大量實際工作中的典型案例與大家分享了廣西自治區人民醫院對產前超聲異常及其他指征中CNV-Seq的應用經驗,指出高通量測序要與產前超聲聯合運用并與臨床隨訪結合起來。田主任提到,胎兒超聲異常是產科在圍產期無法回避的問題,但超聲軟指標和結構異常病例中染色體核型分析異常的僅占10%左右,還有大部分超聲異常的胎兒核型分析是正常的。我們是否應該對這些胎兒進行更深入的遺傳學檢查?田主任談到,受到NT測量的啟發,當NT大于3.5mm時,先心病的風險顯著升高,而其主要原因之一是22號染色體上3Mb左右的染色體微缺失。結合國際上對染色體微陣列分析(CMA)的產前應用指南,以及CMA技術在國內實驗室開展的技術局限性及高昂的成本,廣西區人民醫院選擇CNV-Seq對有需要的孕婦進行染色體結構異常檢測,應用指征包括:①年齡>40歲②既往有妊娠超聲結構異常胎兒史③早孕超聲軟指標異常④NIPS異常⑤中孕期開始:超聲結構異常/多個軟指標異常⑥FGR⑦羊水、臍帶、血流等附屬物異常的孕婦。
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田矛 ?主任

譚虎博士則主要介紹了CNV-Seq在流產胚胎染色體異常檢測中的應用。譚博士指出,自然流產發病率高,且診斷困難,有一半以上的患者在排查了數種可能的原因后仍然找不到流產原因,這給患者家庭帶來極大的心理壓力和經濟負擔的同時,也對臨床診斷帶來了更大的挑戰。譚博士介紹,基于家輝遺傳專科醫院的研究應用,CNV-Seq能在流產胚胎中實現50%左右的診斷率。該技術對送檢樣本的要求很低,對于細胞培養核型分析失敗率較高的流產胚胎有很好的檢測成功率;其次樣本量僅需50ng DNA,這對需要平行或序貫式的進行多項檢測以提高診斷率的珍貴樣本很有意義。這一點從譚博士分享的多個CNV-Seq流產物檢測的案例中便可知曉。
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譚虎 ?博士

會議的最后,貝瑞和康產品經理任志林博士以“未來已來”為題,對本次深度研討會進行了總結陳述。任博士表示,時代在發展,技術在進步。正如Mark?I. Evans所說,在現有技術的檢出能力下,如今的每一個孕婦都相當于以前按年齡劃分的38歲高風險,都可以考慮進行產前診斷。隨著檢測技術的進一步發展,以及臨床數據庫資源特別是中國人自己的數據庫資源的不斷積累和共享,未來的遺傳病診斷將進入更安全、更精準、更全面的時代,并且這個未來已經通過廣大臨床專家的努力正向我們穩步走來。

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任志林 ?博士